AMA RUT Pro

Селективный уреазный тест для определения

Helicobacter pylori 

Срабатывает на

активность уреазы, а не от изменения рH

Почему важно, чтобы тест срабатывал на уреазу, а не на pH?

Потому что pH может стать причиной ложной реакции теста, если тест не является селективным.

вторая реакция без первой  =  ложное срабатывание

Тогда как при неправильной – индикаторная реакция вызвана посторонним повышением pH, не связанным с уреазной активностью H. pylori

История проблемы ложных срабатываний

В 1980-х с проблемой ложно-
положительных срабатываний 
столкнулся [1] Барри Маршалл, 
изобретатель быстрого

уреазного теста CLO-test:

«Когда у пациентов избыточное слюноотделение

или рефлюкс щелочной желчи в желудок,

эти жидкости способны контаминировать

маленький образец желудочной биопсии,

так что рН на его поверхности превышает 6.0» [2]

Исследователи связывали нецелевое слабое окрашивание некоторых быстрых уреазных тестов с повышенным рН биоптата [3]

Ложные и целевые окрашивания быстрых уреазных тестов в клинической практике

Целевые окрашивания:

последующее гистологическое исследование подтвердило положительный Нр-статус биоптатов 

* сфотографированные тесты не имеют отношение к продукции компании АМА

Ложные окрашивания сложно отличить от целевых [4]

Почему возможно ложное окрашивание теста?

1) Физиологические причины в самом биоптате:

• исследование слоя слизистого эпителия желудка in vitro показало среднее рН

   на уровне 6.9 [5] 
• измерения при помощи микроэлектродов показали, что рН желудочного

   эпителия варьируется от 6.0 до 7.2 на фоне различных факторов [6] 
 
(индикатор бромтимоловый синий, использующийся в быстрых уреазных тестах, меняет цвет при рН выше 6.5)

2) Загрязнение биоптата посторонними щелочными агентами в результате

• заброса желчи, рН которой может быть >7 [7]
• химических реакций, вызванных автолизом клеток ткани желудка [8]
• воздействия спрея лидокаина (содержит гидроксид натрия) [9] 
• попадания крови на биоптат при биопсии (рН крови в норме >7,3) [10]

Если на результаты влияет посторонний рН 
вместо уреазы Н. рylori, почему быстрые 
уреазные тесты рекомендованы Маастрихтом?

Потому что мировые производители быстрых уреазных тестов изменили их конструкцию (появились селективные уреазные тесты), что позволило принципиально исключить риск нецелевого смещения рН

Маастрихт V: «В клинической практике в случае наличия показаний к проведению ЭГДС и отсутствия противопоказаний к биопсии быстрый уреазный тест является диагностическим методом выбора. В случае положительного результата требуется незамедлительная терапия» [11] 

Что такое селективные уреазные тесты 

Зарегистрированным в России селективным уреазным тестом является

Селективный уреазный тест в России

слой для ферментативной реакции: 

уреаза Н. рylori взаимодействует

с мочевиной, образуется аммиак

разделительный слой, через который

проходит только образовавшийся аммиак 

Селективные уреазные тесты гарантируют срабатывание

только на продукты целевой ферментативной реакции,

исключив влияние рН самого биоптата.

В их конструкции слои ферментативной и индикаторной

реакции разделены [12] 

слой индикаторной реакции: аммиак повышает рН, что приводит к целевому изменению цвета теста

Как и должно быть у селективного уреазного теста, в AMA RUT Pro ферментативная и индикаторная реакции проходят в разных слоях  

реагируют даже на минимальное количество аммиака, появляющегося в результате уреазной реакции

Селективные уреазные тесты: мировой опыт

Тест Pylo Plus, США:

«Разделительный слой является улучшением предыдущих сухих уреазных тестов, обеспечивая возможность 

индикаторной реакции с аммиаком, образовавшимся в результате реакции уреазы с мочевиной, в то же время устраняя ложный индикаторный сигнал» [13]

Тест Pronto-Dry, Франция:

«Элементы теста отделены друг от друга и не соприкасаются…
Отсутствие прямого контакта между исследуемым образцом и 
индикатором исключает ложно-положительные результаты» [14]

Тест HelicotecUT Plus, Тайвань:

«Мембрана, размещаемая между первым и вторым слоями, блокирует гемоглобин и другие вещества, способные

просочиться и помешать тестированию, таким образом она обеспечивает точный результат реакции» [15]

Разделение слоев для исключения нецелевых 
срабатываний стало мировым стандартом

Селективный тест не зависит от рН биоптата и гарантирует

целевую реакцию на уреазную активность

Helicobacter pylori

Благодаря конструкции тест реагирует на целевой метаболит уреазной активности и

не реагирует на другие щелочные вещества.

Производство

В ООО «Ассоциация Медицины и Аналитики» с 2011 года первая в России интегрированная система менеджмента качества, соответствующая требованиям ГОСТ Р ИСО 9001 (ISO 9001) и ГОСТ Р ИСО 13485 (EN ISO13485).
 
Все производственные процессы валидированы

в соответствии с рекомендациями GHTF (Global Harmonization Task Force). Разработана и внедрена комплексная система внутреннего контроля основных

и вспомогательных процессов производства тест-систем и оборудования.

Карта контактов

199034 Санкт-Петербург, 

17 линия В.О. д. 4 – 6 лит. Е пом. 1 Н

Телефон: 8 (812) 380 7699

Email: expert@amarut.com

Бесплатный федеральный номер

8 800 2222840

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 

1. Compositions and methods for the diagnosis of gastrointestinal disorders involving urease. United States Patent № 4,748,113. 1988. Barry J. Marshall.

2. Midolo P., Marshall B. J. Accurate Diagnosis of Helicobacter pylori: Urease Tests. Gastroenterology Clinics of North America. 2000. Vol. 29, №4, P. 871-878. doi.org/10.1016/S0889-8553(05)70154-0 https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0889855305701540

3. van Keeken N., van Hattum E., de Boer W.A. Validation of a new, commercially available dry rapid urease test for the diagnosis of Helicobacter pylori infection in gastric biopsies. Neth J Med. 2006. Vol. 64, №9, Р. 329-333. https://pdfs.semanticscholar.org/02fd/f589158e657332c509a69e38c969ebc74083.pdf

4. Старостин Б.Д. Сопоставление диагностических характеристик индикаторной бумаги и селективного уреазного теста для качественного определения Helicobacter pylori // Universum: Медицина и фармакология : электрон. научн. журн. 2020. № 2-3(66). URL: (дата обращения: 19.03.2020).

5. Bahari H.M., Ross I.N., Turnberg L.A. Demonstration of a pH gradient across the mucus layer on the surface of human gastric mucosa in vitro. Gut. 1982. Vol. 23, №6, Р. 513–516. doi.org/10.1136/gut.23.6.513 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1419716/

6. Cornelia Schade, Gunnar Flemström, Lena Holm. Hydrogen ion concentration in the mucus layer on top of acid-stimulated and -inhibited rat gastric mucosa. Gastroenterology. 1994. Vol. 107,  №1. P. 180-188. doi.org/10.1016/0016-5085(94)90075-2. https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/0016508594900752#ceab10

7. Champion G. et al. Duodenogastroesophageal reflux: Relationship to pH and importance in Barrett's esophagus. Gastroenterology. 1994. Vol. 107, №3. P. 747 – 754. doi.org/10.1016/0016-5085(94)90123-6 https://www.gastrojournal.org/article/0016-5085(94)90123-6/pdf

8. Ulf Westblom. T et al. Evaluation of a rapid urease test to detect Campylobacter pylori infection / Journal of clinical microbiology. 1988. Vol. 26, №7, P. 1393-1394. https://jcm.asm.org/content/jcm/26/7/1393.full.pdf

9. Продуктовая линейка - Лидокаин / Официальный сайт АО Фармстандарт / [Электронный ресурс]. - Режим доступа: URL  (дата обращения 21.02.2020).

10. Hopkins E. Sharma S. Physiology, acid base balance. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing, 2019.

11.  P. Malfertheiner et al. Management of Helicobacter pylori infection—the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017; Vol.66. P.6–30. https://gut.bmj.com/content/66/1/6

12. Rapid urease test / Wikipedia The Free Encyclopedia/ [Электронный ресурс]. – Режим доступа: URL https://en.wikipedia.org/wiki/Rapid_urease_test (дата обращения 19.03.2020).

13. Test Strip for H. pylori detection. WO2012054545A1;US2012094371A1. 2012. Behar Morris. https://worldwide.espacenet.com/patent/search/family/045934470/publication/WO2012054545A1?q=WO%202012054545

14. Urease test for detecting Helicobacter pylori bacteria. World International Property Organization International Publication Number WO 2011/112106 A2. 2011. Stanisław Kafel. https://worldwide.espacenet.com/patent/search/family/044501614/publication/PL390673A1?q=390673

15. Detection test piece and detection method thereof for stomach Helicobacter pylori. CN101748185A.2010. Jiazhen Liu. https://worldwide.espacenet.com/patent/search/family/041608754/publication/CN101748185A?q=pn=CN101748185A

16. Nu sätter vi en ny standard för Hp-test/ Gothia Medical/ [Электронный ресурс]. – Режим доступа: URL https://www.gothiamedical.se/sv/info/produkter/endoskopi/hptest/amarut/ (дата обращения 19.03.2020).

17.Kit Test Ureasa HPylori / Vytrous/ [Электронный ресурс]. – Режим доступа: URL https://www.vytrous.com/product-page/kit-test-ureasa-hpylori (дата обращения 19.03.2020)

1. Visual evaluation express-test for the Detection of Helicobacter pylori Urease Activity in Biopsy Specimen  /MedNet/ [Электронный ресурс]. – Режим доступа: URL http://www.mednet.lv/en/product/2378-110/visual-evaluation-express-test-for-the-detection-of-helicobacter-pylori-urease-activity-in-biopsy-specimen-ama-med-oy/ (дата обращения 19.03.2020).